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中药鉴定领域新突破:DNA条形码

来源:健康报 时间:2013-10-16 15:45:51 热度:1465

中国中医科学院中药研究所所长 陈士林

  面对1万余种中药材品种混乱、真伪难辨的现状,仅靠有经验的老药工眼观、手摸、口尝,以及传统的基原鉴定、形态鉴定、显微鉴定、理化鉴定的方法,已无法适应现代中药产业快速发展的需要。但突破中药鉴定技术的瓶颈也并非易事。在日前召开的第二届中医药行业热点问题暨中药战略大品种培育与研究学术研讨会上,一篇学术报告引起与会专家的高度关注——
  准确的物种鉴定——解决中药材品种混乱问题的关键
  中药材种类繁多,存在同物异名,同名异物等现象,许多来源于近缘植物的多基原品种,甚至还有部分混淆品、伪品等。药材真伪问题是困扰中药材品种质量的关键问题,鉴定方法欠缺也同时严重影响着中医药的疗效与安全。
  近年来,中药材质量问题成为人们关注的焦点。由于药材鉴定失误导致的严重安全性事件层出不穷,解决问题的关键是要有一套进行准确物种鉴定的技术和方法。
  为解决中药鉴定的方法缺失,科技部   2007年在国际科技合作计划中立项“中药材DNA条形码鉴定研究”,国家药典委员会     2009年为建立中药材鉴定创新标准设置了“中国药典中药材DNA条形码鉴定标准”项目,国家高技术研究发展计划(“863”计划)    2011年设立了“基于DNA条形码的珍稀药用、野生等资源快速检测技术及产品研发”项目,从国家层面为中药材DNA条形码研究确定了大的定位和方向。
  为中草药建立通用的“分子鉴定身份证”
  我们科研团队先后几十人参与,历经近10年努力,通过研究比较psbA-trnH、matK、rbcL、rpoC1、ycf5、 ITS2 和 ITS等7个候选DNA条形码,发现ITS2是最佳条形码序列。ITS2长度约230bp,易于扩增和测序,物种鉴定能力强,适合中药材等存在DNA降解材料的鉴定。我们的科研团队创建了ITS2为主体条形码的中草药鉴定体系,为中草药建立了通用的“分子鉴定身份证”,从基因层面解决了中药材与其常见混伪品的物种识别问题,在中药鉴定学领域创建了全新的DNA条形码鉴定方法体系。
  因DNA不受外界环境的影响,鉴定方法稳定可靠,任何一个常规分子实验室均能实现,所以,该技术体系不受经验限制,完全没有鉴定经验的人可以在一周的培训后完成中药材条形码鉴定的整个流程。 课题组建立了中药材DNA条形码鉴定系统网站和几千种中药材DNA条形码鉴定数据库平台,只需键入网址http://www.tcmbarcode.cn,进入中药材DNA条形码鉴定系统主页,点击“物种鉴定”,选择“药材鉴定”,粘贴并提交需要校对的序列,比对序列相似性信息最大的物种即为该序列鉴定结果。截至目前,课题组已经进行DNA条形码研究的常用中药材及混物品包括:人参、西洋参、三七、大黄、石斛、重楼、金银花、麻黄、甘草、冬虫夏草、羌活等几千个物种。中药材DNA条形码鉴定技术体系的建立奠定了中药鉴定学的新格局。
  国内外同行对中药条形码研究给予高度肯定
  中药材DNA条形码鉴定体系在国际国内均产生了广泛影响。课题组起草完成的《中华人民共和国药典中药材DNA条形码分子鉴定指导原则》已经被国家药典委员会采用,以ITS2为主体的中药材DNA条形码鉴定新方法体系和数据库平台已获准纳入《中华人民共和国药典》, 70余篇相关研究论文在Cladistics、PNAS、PLoS ONE、BMC等国际著名刊物上发表,其中《公共科学图书馆:综合》刊发的论文《验证ITS2序列作为通用DNA条形码序列鉴定药用植物》,被德国ITS2专业网站选为近25年来在该领域最受关注的16篇文章之一 ,发表后3年被引用约300次。2009年国际条形码协会(CBOL)邀请课题组在墨西哥举办的“第三届国际条形码大会”上做学术报告。我们的论文“药用植物DNA条形码鉴定策略及关键技术分析”、“基于DNA barcoding(条形码)技术的中药材鉴定”被评为“2012年中国百篇最具影响的优秀的国内学术论文”。
  目前,DNA条形码鉴定系统已经转让给几十家企业和公司投入实际应用。我们有理由相信,DNA条形码鉴定体系必将更加广泛地应用于中药材流通、中药生产企业原料监管、中药饮片真伪鉴定、海关中药材进出口鉴定与管理、出入境检验检疫等诸多领域。

(责任编辑:秋彤)

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